Colectinas e galectinas são proteínas da família das lectinas que possuem a capacidade de reconhecer padrões moleculares associados aos patógenos. Estudos em bovinos têm demonstrado a alta expressão dessas proteínas durante a infecção por nematoides gastrintestinais. O objetivo deste estudo foi investigar se o nível de infecção de Haemonchus contortus altera a expressão de colectinas (SPA e CGN) e galectinas (Gal11 e Gal14) de ovinos. Doze ovinos da raça Corriedale expostos a infecção natural com nematoides foram separados em dois grupos: grupo 1 (G1, n=7) com menor grau de parasitismo; e grupo 2 (G2, n=5) com maior grau, a partir da contagem do número de parasitos recuperados do abomaso e OPG. A contagem de OPG e de parasitos recuperados do abomaso dos grupos G1 e G2 apresentaram diferença estatística (p<0,05). A expressão dos genes de colectinas e galectina foi observada em todas as amostras de abomaso dos ovinos, porém animais com menor grau de infecção apresentaram menor expressão dos genes de Gal14, SPA e CGN (p<0,05). A expressão de lectinas foi associada ao número de H. contortus encontrados no abomaso de ovinos, indicando um possível papel dessas proteínas no controle da infecção.

Galectins and collectins are proteins classified in the lectin family that have the ability to recognize molecular patterns associated with pathogens. Studies on cattle have demonstrated high expression of these proteins during infection with gastrointestinal nematodes. The aim of this study was to investigate whether the level of Haemonchus contortus infection would alter the expression of galectins (Gal11 and Gal14) and collectins (SPA and CGN) in sheep. Twelve Corriedale sheep exposed to natural infection with nematodes were divided into two groups: group 1 (G1, n = 7) and group 2 (G2, n = 5), with low and high parasite burdens, respectively, based on fecal egg counts and abomasal parasite counts. The fecal egg counts and abomasal parasite counts were significantly different (p < 0.05) between the groups. Galectin and collectin gene expression was observed in all sheep abomasal samples. However, animals with lower infection levels showed lower expression of the genes Gal14, SPA and CGN (p < 0.05). Expression of lectins was associated with the abomasal H. contortus burden, thus suggesting that these proteins may have a role in controlling of this infection.

Neste estudo a transmissão transplacentária de Neospora caninum foi avaliada em fêmeas em diferentes estágios de gestação. Três cadelas foram inoculadas na 3ª semana e três na 6ª semana de gestação com 10(8) taquizoítos de N. caninum (cepa Nc-1). Todas as cadelas infectadas, e pelo menos um de seus filhotes, apresentaram anticorpos anti-N. caninum por imunofluorescência indireta (RIFI > 400). Os filhotes e suas mães foram sacrificados e tecidos de sistema nervoso central (SNC), linfonodo poplíteo, músculo esquelético, cérebro, pulmões, coração e fígado foram analisados para a presença de N. caninum pela reação em cadeia da polimerase (nested PCR), polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição (RFLP) e imunoistoquímica (IHQ). O parasita foi encontrado em filhotes em linfonodo, SNC, coração e fígado pela nested PCR. Mortalidade perinatal não apresentou diferença entre os filhotes das cadelas infectadas na 3ª semana (60%) ou na 6ª semana de gestação (53,8%).

In this study, transplacental transmission of Neospora caninum in bitches at different stages of pregnancy was evaluated. Three bitches were inoculated in the 3rd week and three in the 6th week of gestation with 10(8) tachyzoites of N. caninum (Nc-1 strain). All the infected bitches and at least one of their offspring presented anti-N. caninum antibodies according to the indirect fluorescent antibody test (IFAT > 400). The pups and their mothers were sacrificed and tissues from the central nervous system (CNS), popliteal lymph nodes, skeletal muscle, brain, lungs, heart and liver were analyzed for the presence of N. caninum using the nested polymerase chain reaction (nested PCR), restriction fragment length polymorphism (RFLP) and immunohistochemistry (IHC). The parasite was found in the pups in lymph node, CNS, heart and liver tissues using nested PCR. There was no difference in perinatal mortality between the offspring from bitches infected in the 3rd week of gestation (60%) and in the 6th week (53.8%).

O presente estudo teve por objetivo diagnosticar a infecção experimental e natural pelo Toxoplasma gondii em pombos (Columba livia) por técnicas sorológicas, biológicas e moleculares. Doze pombos, livres de infecção, foram inoculados com 50 oocistos esporulados de T. gondii (amostra VEG), e quatro permaneceram como controles não infectados. Aos 15, 30, 45 e 60 dias pós-infecção (dpi), quatro aves (três infectadas e uma controle) foram sacrificadas e com seus tecidos realizou-se bioensaio em camundongos e nested-PCR, utilizando-se B1 como gene alvo. Sangue, para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii, foi obtido semanalmente, e a presença de anticorpos foi determinada pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e pela técnica de aglutinação modificada (MAT). Dos 12 pombos inoculados, sete (58,3%) foram positivos pelas técnicas sorológicas, apresentando títulos que variaram de 40 a 5.120 no MAT e de 512 a 4.096 na RIFI. Concordância total foi observada entre os resultados obtidos pelas técnicas sorológicas e pela nested-PCR com sete animais positivos. No bioensaio em camundongos, dos 12 pombos inoculados, cinco (41,7%) foram positivos ao T. gondii. Apenas um pombo veio a óbito no 23º dpi, devido à toxoplasmose. Um segundo estudo, com pombos de vida livre, foi realizado para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii. As aves foram capturadas nos municípios de São Paulo, Ibiúna e Sorocaba, Estado de São Paulo. Todos os 126 pombos de vida livre foram negativos a anticorpos anti-T. gondii, testados pelo MAT (título < 5). Foram realizados bioensaios em camundongos com tecidos de todas as aves capturadas e também, por esta técnica, T. gondii não foi isolado em nenhuma ave.

This study aimed to diagnose experimental and natural Toxoplasma gondii infection in pigeons (Columba livia) by serological, biological and molecular techniques. Twelve pigeons, free of infection, were inoculated with 50 sporulated oocysts of T. gondii (VEG sample) and four remained uninfected controls. Four birds (three infected and one control) were euthanized at 15, 30, 45 and 60 days post-infection (dpi), and their tissues were used to perform a bioassay in mice and nested-PCR using B1 gene as target. Blood was obtained weekly and it was tested for the presence of anti-T. gondii antibodies by the indirect fluorescent antibody test (IFAT) and modified agglutination test (MAT). Seven (58.3%) out of 12 inoculated pigeons were positive by serological techniques and titers ranged between 1:40 and 1:5120 by MAT and between 1:512 and 1:4096 by IFAT. Complete agreement was seen between the results obtained by serological techniques and nested-PCR in seven positive birds. In the bioassay in mice, five (41.7%) out of 12 pigeons inoculated were positive to T. gondii. Only one pigeon died at 23 dpi due to toxoplasmosis. A second study with free-living pigeons was performed for detection of anti-T. gondii antibodies. Birds were captured in the municipalities of São Paulo, Ibiúna and Sorocaba, São Paulo State, Southeastern Brazil. All 126 free-living birds were negative to anti-T. gondii antibodies by MAT (titer < 1:5). Bioassays were performed in mice with tissues from all captured birds and T. gondii was not isolated in any pigeon.

Neospora caninum é um dos principais agentes causadores de abortamentos e natimortalidade em bovinos. A defesa imune do hospedeiro é capaz de inibir a atividade dos taquizoítos na fase aguda da infecção, mas não age sobre os bradizoítos nos cistos teciduais. A ativação e a modulação dessa resposta de defesa são controladas por mediadores celulares. A técnica do RT-PCR em tempo real foi empregada para a detecção de alguns desses mediadores durante a infecção pelo N. caninum. Foram analisadas amostras de linfonodos poplíteos, fígado e córtex cerebral de bezerros Holandeses e Nelores infectados com taquizoítos por via intramuscular e controles não-infectados, abatidos no sexto dia pós-inoculação. A RT-PCR em tempo real detectou a expressão dos genes em todos os tecidos analisados. Não houve variação significativa na expressão do gene GADPH entre os grupos, a eficiência de amplificação desse foi similar aos demais genes testados e foi empregado como controle endógeno na análise. A comparação entre infectados e não-infectados permitiu a quantificação relativa da expressão gênica. A expressão dos genes IFN-γ e TNF-α apresentou elevação significante em algumas amostras. Os genes iNOS e TGF-β1 apresentaram algumas variações não-significativas e os valores de IL-4 e IL-10 permaneceram praticamente inalterados.

Neospora caninum is one of the main causes of abortion and natimortality in cattle. Host immune defense is capable to inhibit tachyzoite activity during acute infection, but there is no action against bradyzoites in tissue cysts. Activation and modulation of this response is controlled by cell mediators. The real-time RT-PCR technique was employed to detect some of those mediators during N. caninum infection. Holstein and Nelore calves intramuscularly infected with tachyzoites and uninfected controls were slaughtered at the sixth day post-infection and popliteal lymph node, liver and brain cortex samples were analyzed. Real-time RT-PCR detected gene expression in all tissues. No significant variation of GAPDH gene expression was detected among groups, its amplification efficiency was similar to the other genes tested and it was used as the endogenous control for the analysis. Comparisons between infected and uninfected groups allowed the relative gene expression quantification. IFN-γ and TNF-α genes showed increased expression in some samples. iNOS and TGF-β1 genes had some non-significant variations and IL-4 and IL-10 stayed pratically inaltered.

Dois experimentos foram realizados para se conhecer a dinâmica dos anticorpos séricos (IgG) em bezerros após infecção com Haemonchus placei. No Experimento 1 estudou-se os níveis de IgG ao longo da primeira e segunda infecção. No Experimento 2 a influência de diferentes níveis protéicos da dieta e a resposta à infecção, medida através dos níveis de IgG séricos, foi observada em bezerros imunizados e não imunizados, através de infecções sucessivas e experimentalmente desafiados com L3 de H. placei. Observou-se que os bezerros infectados desenvolveram resistência a reinfecções, com acentuado decréscimo nos valores de ovos por grama de fezes (OPG) na segunda infecção. Entretanto, nesse mesmo período, os níveis de IgG séricos mantiveram-se elevados, independentes do decréscimo do OPG. Observou-se também que bezerros submetidos a dieta protéica adequada apresentaram maior produção de IgG sérico, sugerindo uma melhor resposta às infecções quando comparados aos submetidos a dietas com níveis protéicos mais baixos.

Two experiments were conducted to determine the serum antibody (IgG) dynamic in calves infected with Haemonchus placei. At Experiment 1, the IgG level during the first and second experimental infection were measured and at Experiment 2, the influence of dietary protein and immunization on IgG levels. The calves were immunized using successive H. placei infection truncated by the use of anthelmintic and challenged with 100,000 L3. The infected calves developed a high level of protection, with a significant reduction on fecal egg counts (EPG) at the second infection. However, at the same period, the IgG values continue to presented high levels, independent of the EPG decrease. It was also observed that calves submitted to an adequate protein diet presented a higher IgG level, suggesting an influence on immune response to the infection when compared to the low protein diet calves.